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    ELISA試劑盒洗液運(yùn)用準(zhǔn)則與洗滌方法

    發(fā)布時間: 2018-01-25  點(diǎn)擊次數(shù): 1392次

    洗刷在ELISA試劑盒過程中雖不是一個反響過程,但卻也決議著試驗(yàn)的勝敗。ELSIA就是靠洗刷來到達(dá)分離游離的和結(jié)合的酶符號物的意圖。
    Elisa試劑盒洗刷液運(yùn)用準(zhǔn)則
    1.某一項意圖洗液主張運(yùn)用該試劑盒內(nèi)的洗液;
    2.同一elisa試劑盒洗液用完了,主張選用同一批號的洗液;
    3.同一批號的洗液也用完了,主張選用同一項意圖試劑洗液;
    4.同一項意圖洗液用完了,主張運(yùn)用該項目其他廠家的洗液;
    5.同一項目一切廠家都用完了,主張選用同一系列項意圖洗液(比方甲乙丙丁戊庚肝抗體檢測,歸于肝炎系列,急用時可以暫時混用);
    6.不主張國產(chǎn)洗液與進(jìn)口洗液混用,也更不主張不同系列項意圖洗液混用,這兩點(diǎn)都是因?yàn)橄匆旱难b備成分不同,特別是不同項意圖洗液(正規(guī)試劑廠家),首要組分都不太相同。
    盡管對強(qiáng)陽性標(biāo)本影響不是很大,但關(guān)于臨界陽性陰性(灰區(qū))標(biāo)本影響較大,所以不發(fā)起不同系列項目洗液混用。
    ELISA試劑盒洗刷方法
    (1)浸泡式
     a.吸干或甩干孔內(nèi)反響液;
    b.用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后,即甩去);
    c.浸泡,行將洗刷液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時刻不行隨意縮短;
    d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
    e.重復(fù)操作c和d,洗刷3-4次(或按說明規(guī)則)。在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時刻。
    微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的結(jié)合是疏水性的,非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán),也含親水基團(tuán),其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵結(jié)合,然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的結(jié)合,并借助于親水基團(tuán)和水分子的結(jié)合作用,使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況,然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高于0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。
    (2)流水沖刷式
    ELISA試劑盒流水沖刷法開始用于小珠載體的洗刷,洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來水。洗刷時附接一特別裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地翻滾淋洗,持續(xù)沖刷2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖刷式則比如淋浴,其洗刷作用更為*,且也簡潔、快速。已有試驗(yàn)標(biāo)明,流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗刷作用更佳。

     

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