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    ELISA試劑盒樣本試驗(yàn)預(yù)備

    發(fā)布時(shí)間: 2018-02-23  點(diǎn)擊次數(shù): 1214次

    ELISA試劑盒樣本試驗(yàn)預(yù)備:
    在搜集樣本前都有必要有一個(gè)完好的方案,有必要清楚要檢測(cè)的成份是否滿足安穩(wěn)。對(duì)搜集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的樣本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。關(guān)于隔天再檢測(cè)的樣本,及時(shí)分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆?,有條件的,-70℃凍存?zhèn)溆?。?biāo)本應(yīng)防止重復(fù)凍融。
    液體類標(biāo)本:  包含血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培育上清等。
    1. 細(xì)胞培育上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。
    2. ELISA試劑盒培育細(xì)胞:檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。經(jīng)過(guò)重復(fù)凍融或參加安排蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
    3. 安排標(biāo)本:切開(kāi)標(biāo)本后,稱取分量。參加一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本消融后依然堅(jiān)持2-8℃的溫度。參加一定量的PBS(PH7.4),或安排蛋白萃取試劑, 用手藝或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。分裝后一份待檢測(cè),其他冷凍備用。
    4. 血清:室溫血液自然凝結(jié)10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
    5. ELISA試劑盒血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。
    6. 尿液:用無(wú)菌管搜集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。細(xì)心搜集上清。保存過(guò)程中如有沉積構(gòu)成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)施。

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